Амідаза (AMD)
ферменти:Є високомолекулярними біологічними каталізаторами, більшість ферментів є білками
Амідаза:Каталізують гідроліз різних ендогенних і сторонніх аліфатичних і ароматичних амідів шляхом перенесення ацильної групи у воду з утворенням вільних кислот і аміаку.Гідроксамова кислота та інші органічні кислоти широко використовуються як лікарські засоби, оскільки вони входять до складу факторів росту, антибіотиків та інгібіторів пухлин.Амідази можна розділити на ацилази R-типу та S-типу відповідно до стереоселективності каталізатора.
Окрім каталізації гідролізу амідів, амідаза також може каталізувати реакції ацильного перенесення в присутності ко-субстратів, таких як гідроксиламін.
Амідази з різних джерел мають різну субстратну специфічність, деякі з них можуть гідролізувати лише ароматичні аміди, деякі з них можуть гідролізувати лише аліфатичні аміди, а деякі гідролізують α- або ω-аміноаміди.Більшість амінів мають хорошу каталітичну активність лише для ациклічних або простих ароматичних амідів, але для складних ароматичних сполук гетероциклічні аміди, особливо аміди з орто-замісниками, зазвичай мають низьку активність (лише кілька ферментів виявляють кращі каталітичні ефекти).
Каталітичний механізм:
| ферменти | Код продукту | Код продукту |
| Ферментний порошок | ES-AMD-101~ ES-AMD-119 | набір з 19 амідаз, по 50 мг кожна 19 штук * 50 мг / штука або інша кількість |
| Набір скринінгу (SynKit) | ES-AMD-1900 | набір 19 амідаз по 1 мг 19 шт * 1мг / шт |
★ Висока субстратна специфічність.
★ Сильна хіральна вибірковість.
★ Висока ефективність перетворення.
★ Менше побічних продуктів.
★ М'які умови реакції.
★ Екологічно чистий.
➢ Скринінг ферментів слід проводити для конкретних субстратів через специфічність субстрату та отримати фермент, який каталізує цільовий субстрат із найкращим каталітичним ефектом.
➢ Ніколи не контактуйте з екстремальними умовами, такими як: висока температура, високий/низький pH і органічні розчинники з високою концентрацією.
➢ Зазвичай реакційна система повинна включати субстрат, буферний розчин (оптимальний pH реакції ферменту).Субстрати, такі як гідроксиламін, повинні бути присутніми в системі реакції перенесення ацилу.
➢ AMD слід додавати в останню чергу в реакційну систему з оптимальним pH і температурою реакції.
➢ Усі види ВМД мають різні оптимальні умови реакції, тому кожен з них слід додатково вивчати окремо.
Приклад 1(1):
Гідролізна активність до різних амідних субстратів
| Підкладка | Конкретна діяльність мкмоль хв-1mg-1 | Підкладка | Конкретна діяльність мкмоль хв-1mg-1 |
| Ацетамід | 3.8 | ο-OH бензамід | 1.4 |
| Пропіонамід | 3.9 | p-OH бензамід | 1.2 |
| Лактамід | 12.8 | ο-NH2бензамід | 1.0 |
| Бутирамід | 11.9 | p-NH2бензамід | 0,8 |
| ізобутирамід | 26.2 | ο-Толуамід | 0,3 |
| Пентанамід | 22.0 | p-Толуамід | 8.1 |
| Гексанамід | 6.4 | Нікотинамід | 1.7 |
| Циклогексанамід | 19.5 | Ізонікотинамід | 1.8 |
| Акриламід | 10.2 | Піколінамід | 2.1 |
| Метакриламід | 3.5 | 3-фенілпропіонамід | 7.6 |
| Пролінамід | 3.4 | Індол-3-ацетамід | 1.9 |
| Бензамід | 6.8 |
Реакцію проводили в 50 мМ буферному розчині фосфату натрію, pH 7,5, при 70 ℃.
| Аміди | гідроксиламін | Гідразин |
| Ацетамід | 8.4 | 1.4 |
| Пропіонамід | 18.4 | 3.0 |
| ізобутирамід | 25,0 | 22.7 |
| Бензамід | 9.2 | 6.1 |
Реакцію проводили в 50 мМ буферному розчині фосфату натрію, pH 7,5, при 70 ℃.
Відповідна концентрація реагенту: аміди, 100 мМ (бензамід, 10 мМ);гідроксиламін і гідразин, 400 мМ;ферменту 0,9 мкМ.
Приклад 2(2):
Приклад 3(3):
1. D'Abusco AS, Ammendola S. та ін.Екстремофіли, 2001, 5:183-192.
2. Guo FM, Wu JP, Yang LR та ін.Біохімія процесів, 2015, 50(8): 1400-1404.
3. Zheng RC, Jin JQ, Wu ZM та ін.Біоорганічна хімія, 2017, доступний онлайн 7.
